摘要：

肿瘤微环境是肿瘤的重要组成之一,微环境中含有多种可溶性细胞因子,这些细胞因子介导了肿瘤细胞与非肿瘤细胞的交流,参与了肿瘤的发生和发展.人前梯度蛋白2(Anterior gradient 2,AGR2)在多种腺癌中被检测到高表达,其分布囊括了细胞质,细胞膜,细胞外空间并且存在于多种癌症病人的外周血液中.目前有关AGR2的研究主要集中在其对肿瘤自身的影响以及胞内AGR2的作用机制,这些研究表明AGR2的高表达促进了肿瘤细胞的存活,增殖,迁移,恶性转化以及药物抗性发展.然而,分泌型AGR2对肿瘤基质细胞的作用鲜有报道,相关的作用机制更是一片空白.本课题针对这一现状对分泌型AGR2与肿瘤血管形成之间的关系及机制进行了深入研究.研究结果表明,在肿瘤间隙液中AGR2有高浓度的积累(2.67μg/ml),分泌的AGR2能够促进血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维生长因子(b FGF/FGF2)的活性,从而间接促进血管内皮细胞的增殖,迁移并最终导致血管形成.另外,AGR2还能够独立促进成纤维细胞的侵袭.进一步的机制研究表明,AGR2是通过和VEGF及b FGF直接结合,通过增加它们的二聚化程度从而提高了局部的活性细胞的因子浓度.AGR2的这种促血管形成的活性能够被特异性单克隆抗体18A4所阻断,从而抑制有AGR2表达的肿瘤的生长,当18A4和抗VEGF的抗体Avastin联合使用时能够获得最大的肿瘤抑制效果.本课题所发现的这一AGR2新作用机制直接将分泌型AGR2与肿瘤微环境中旁分泌信号网络联系了起来,暗示分泌型AGR2是一个可被阻断的抗肿瘤治疗靶标.此外,通过运用CDR移植,去免疫原化分析及专门开发的人源化抗体快速构建质粒系统p HAb-FAST,我们还构建出了具有较低潜在免疫原性的人源化抗体18A4Hu I.理化性质及抗肿瘤实验表明18A4Hu I具有与18A4相似的亲和力及抗肿瘤效果.综上所述,本课题揭示了分泌型AGR2的一种新作用机制并成功构建了人源化抗AGR2抗体18A4Hu I,这为以AGR2为靶标的抗体治疗奠定了良好的理论和物质基础.

展开