流式细胞术和LDH释放法检测NK细胞杀伤效能的实用性比较

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作者:

阳莉丘秀生胡元陈晓燕陈伟材卢建溪

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摘要:

目的流式细胞术和乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)体外杀伤功能的比较和优化.方法以人外周血PBMCS经体外诱导扩增的NK细胞为效应细胞,K562细胞作为靶细胞,按5:1,10:1,20:1,40:1效靶细胞比共培养,分别采用LDH法和流式细胞术检测靶细胞死亡率.结果在4个效靶细胞比实验组中,5:1效靶细胞比条件下LDH释放法检测的靶细胞死亡率显著低于CFSE/PI标记法,其他3个效靶细胞比组的两种方法检测结果无显著性差异.高效靶比,细胞毒作用较强时,LDH释放法的结果误差较大,可重复性不强.结论流式细胞术和LDH释放法检测NK细胞体外杀伤效能的最佳效靶细胞比为10:1.流式细胞术比LDH法灵敏度更高,稳定性更好;在效靶细胞比为10:1的实验条件下,LDH法可作为流式细胞术的替代方法.

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年份:

2021

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