摘要：

目的 筛选 5 种临床常用抗肿瘤中药所含的单体化合物,并揭示其发挥抗肺癌转移作用的机制.方法 体外培养人肺腺癌循环肿瘤细胞 CTC-TJH-01,人肺腺癌细胞 H1975 和人支气管上皮样细胞 16HBE.采用 CCK-8 法检测 5 种中药单体(重楼皂苷Ⅶ,熊果酸,蟾毒灵,姜黄素,黄芪甲苷Ⅳ)对上述 3 种细胞的增殖抑制作用.将 CTC-TJH-01 和 H1975 细胞分别分为 DMSO 组(对照组)和重楼皂苷Ⅶ高,低浓度组(0.75,1.5 μmol·L),分别干预 24 h;采用流式细胞术检测细胞周期,细胞凋亡和 Caspase-3/8/9 的活性;采用Hoechst 33342 染色法和 TUNEL 法检测细胞凋亡情况;采用 Western Blot 法检测细胞 DNA 损伤及死亡受体通路相关蛋白表达水平.结果 除黄芪甲苷Ⅳ外,不同浓度的重楼皂苷Ⅶ,熊果酸,蟾毒灵和姜黄素对 CTC-TJH-01,H1975 及 16HBE 细胞的增殖(24,48 h)均具有明显的抑制作用(P<0.05,P<0.01,P<0.001).与 DMSO 组比较,重楼皂苷Ⅶ可将 CTC-TJH-01,H1975 细胞周期阻滞在 G0/G1 期(P<0.05,P<0.01),明显诱导 CTC-TJH-01,H1975 细胞发生凋亡(P<0.001);可诱导 CTC-TJH-01 细胞发生 DNA 损伤和细胞核固缩(P<0.001),且 DNA损伤相关蛋白 PARP1,γ-H2AX 和死亡受体通路相关蛋白 TNF-R1,DR5 的表达显著上调(P<0.05,P<0.01,P<0.001),Survivin 蛋白表达水平显著下调(P<0.05,P<0.001),Caspase-3/8/9 活化水平明显提高(P<0.05,P<0.01,P<0.001),但对 H1975 细胞的 DNA 损伤无明显影响(P>0.05).结论 重楼皂苷Ⅶ主要通过死亡受体通路诱导 CTC-TJH-01,H1975 细胞发生凋亡,还可通过 DNA 损伤相关通路诱导 CTC-TJH-01 细胞发生凋亡,而H1975 细胞对重楼皂苷Ⅶ更敏感.

展开