摘要：

前列腺癌在许多西方国家是男性泌尿系最常见的恶性肿瘤,我国前列腺癌发病率也有明显增加的趋势.前列腺癌从发生到有临床症状表现,往往需要长达十几甚至几十年的时间.目前普遍认为,从正常前列腺组织发展到前列腺癌经历了前列腺上皮细胞内瘤,局部前列腺癌,侵袭性前列腺癌和转移性前列腺癌等几个阶段.目前尽管对于前列腺癌发病的分子机制尚未完全阐明,但和大多数肿瘤发展一样,前列腺癌的发生发展是一个涉及多因素,多步骤,多基因的过程.其中细胞凋亡(细胞程序性死亡)过程失去控制在肿瘤形成过程中起着十分重要的作用,包括促进或阻止细胞凋亡的各种凋亡相关蛋白等.Survivin是近来发现的一种凋亡抑制蛋白,主要功能可能是抑制Caspase-3的促凋亡作用以及Caspases,Fas,Bax等凋亡相关蛋白.Caspase-3剪切管家蛋白和DNA片段,是凋亡级联反应的最终效应蛋白.Survivin与人类的非小细胞肺癌,前列腺癌,胃肠道肿瘤等多种肿瘤的恶性程度显著相关.本研究旨在探讨Survivin与Caspase-3在前列腺癌中的表达及与前列腺癌临床病理特征的关系,并探讨二者的相关性. 1材料与方法 1.1标本来源 收集温岭市人民医院2000年1月至2006年1月间手术切除的29例前列腺腺癌标本,均经病理证实.离体后常规经10%中性福尔马林固定48h,石蜡包埋,4μm切片.行HE染色和免疫组化染色.所有病例均为初治者,未经内分泌治疗或放疗.患者年龄56～88岁,中位年龄74岁.术前均检测血清前列腺特异性抗原(serumprostate-specificantigen,),其中<4μg/L7例,4～10μg/L9例,>10μg/L13例.Jewett-Whitmore-Prout(J-W-P)肿瘤分期:A期2例,B期12例,C期5例,D期10例.Gleason病理分级:2-4分4例,5-7分13例,8-10分12例. 同时收集温岭市人民医院2005年开放手术切除良性前列腺增生标本20例作为对照,患者年龄56～86岁,中位年龄73岁. 1.2免疫组化 1.2.1免疫组化试剂:Survivin鼠抗人单克隆抗体(克隆号4F7),Caspase-3鼠抗人单克隆抗体(克隆号3csp03)购自美国AntibodyDiagnostica公司,EnVisionTMHRP标记的羊抗鼠IgG(即用型)为丹麦DAKO公司产品. 1.2.2采用EnVisionTM两步法,按照免疫组化常规步骤操作.石蜡切片的抗原修复采用10mmol/L的柠檬酸抗原修复液(pH6.0),高压锅加帽出气后3分钟,快速冷却;Survivin(抗体稀释比1:50)与Caspase-3单克隆抗体(抗体稀释比1:50),4℃过夜.以已知阳性的乳腺癌切片作为阳性对照,以PBS替代一抗作为阴性对照. 1.3结果判定标准 Survivin以细胞质有棕黄色颗粒者为阳性细胞,Caspase-3以细胞核有棕黄色颗粒者为阳性细胞.参照Caide等的计数方法,放大400倍镜下计数至少5个视野,取其平均值为该病例的细胞阳性率(%). 1.4统计学方法 前列腺癌与良性前列腺增生之间的阳性表达率比较用Mann-Whitney检验,Spearman等级相关方法分析临床病理资料与免疫组化结果的关系,同时分析Survivin与Caspase-3之间的相关性.所有资料均在SPSS11.5软件下操作.P<0.05定为统计学差异有显著性. 2结果 2.1Survivin与Caspase-3在前列腺癌和良性前列腺增生组织中的表达 前列腺癌中的Survivin蛋白染色在胞质弥漫分布,染色阳性率(82.76%±7.14%)显著高于良性前列腺增生(20.00%±9.18%)(P<0.001). 前列腺癌中的Caspase-3蛋白在癌细胞核染色较多,周围正常组织未见染色,染色阳性率(58.62%±9.31%)低于良性前列腺增生(90.0%±6.88%)(P<0.05). 2.2Survivin与Caspase-3表达与前列腺癌各项临床病理特征的关系 Survivin的表达强度与前列腺癌术前PSA水平,Gleason分级及临床病理分期(P<0.01)正相关.Caspase-3的表达强度与上述临床病理特征无关(P>0.05). 2.3Survivin与Caspase-3表达的关系 Spearman等级相关分析表明,前列腺癌Survivin的表达与Caspase-3的表达具有负相关性(rho=-6.03,P=0.001). 3结论 本研究发现Survivin蛋白在前列腺癌较良性前列腺增生中表达增加,与术前PSA水平,临床分期和病理分级正相关.前列腺癌中的Caspase-3蛋白表达强度显著低于良性前列腺增生,与上述临床病理特征无关.Survivin蛋白表达与Caspase-3蛋白表达之间负相关.提示Survivin和Caspase-3蛋白在前列腺癌的发生发展中起重要作用,Caspase-3在前列腺癌中的表达降低可能与Survivin有关联.

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