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Additional modules for versatile and economical PCR-based gene deletion and modification in Saccharomyces cerevisiae.

来自 Wiley

阅读量：

285

作者：

MS Longtine，MKA Rd，DJ Demarini，NG Shah，A Wach，A Brachat，P Philippsen，JR Pringle

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摘要：

An important recent advance in the functional analysis of genes is the of the one-step -mediated technique for deletion and modification of chromosomal genes. This method allows very rapid gene manipulations without requiring plasmid clones of the gene of interest. We describe here a new set of plasmids that serve as templates for the synthesis of fragments that allow a variety of gene modifications. Using as selectable marker the gene or modules containing the heterologous + or (r) gene, these plasmids allow gene deletion, gene overexpression (using the regulatable promoter), C- or N-tagging [with (S65T), , or the 3HA or 13Myc ], and partial N- or C-terminal deletions (with or without concomitant protein tagging). Because of the modular nature of the plasmids, they allow efficient and economical use of a small number of primers for a wide variety of gene manipulations. Thus, these plasmids should further facilitate the rapid analysis of gene function in .

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关键词：

epitope tagging green fluorescent protein functional analysis overexpression studies gene deletion gene truncation

DOI：

10.1002/(SICI)1097-0061(199807)14:10<953::AID-YEA293>3.0.CO;2-U

被引量：

9303

年份：

1998

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