摘要：

目的探讨溶血磷脂酸(LPA)对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡的保护作用及作用机理.有研究表明LPA与细胞凋亡密切相关,并且研究发现,卵巢癌患者血浆中的LPA浓度明显高于正常人,且卵巢癌患者腹水中LPA更是显著升高.本研究体外培养卵巢癌细胞株SKOV3,3AO,CAOV3,发现三株细胞均不同程度的表达LPA受体.这些研究结果均提示LPA与卵巢癌的发生,发展,预后密切相关.顺铂(cisplatin,DDP)作为卵巢肿瘤的一线化疗药物疗效已肯定,研究表明顺铂可诱导肿瘤细胞凋亡.但肿瘤细胞对顺铂产生耐药性的问题限制了顺铂的临床应用,尤其是随着化疗疗程的延长,最终有80%的患者发生继发性耐药,严重影响了卵巢癌患者的预后.为此本研究应用DDP诱导卵巢癌细胞凋亡,探讨LPA对卵巢癌细胞凋亡是否有保护作用,为临床应用针对LPA及LPA受体的治疗以增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性提供理论依据.方法体外培养卵巢癌细胞株SKOV3;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测LPA对顺铂(DDP)作用后的卵巢癌细胞株SKOV3增殖活性的影响;Hochest 33258荧光染色观察凋亡细胞;用流式细胞术(FCM)分析细胞周期变化和细胞凋亡率;DNA片段凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA"梯状"条带;免疫细胞化学法及RT-PCR法分别检测细胞凋亡相关蛋白及其mRNA的表达.结果LPA能降低顺铂对SKOV3细胞生长的抑制作用,同时增加G0-G1期细胞比例,降低S期细胞比例和凋亡率;Hochest 33258示LPA作用后凋亡小体明显减少.DNA片段凝胶电泳示LPA作用后不产生明显的凋亡片段.10μmol/L的LPA作用SKOV3细胞48h后,bcl-2基因和蛋白表达水平升高,而bax基因和蛋白表达水平降低(P<0.01).结论LPA对DDP诱导的卵巢癌细胞的凋亡有保护作用, LPA可通过上调bcl-2基因及蛋白表达,下调bax基因及蛋白表达,抑制DDP诱导的卵巢癌细胞凋亡.因此针对LPA的治疗,有望提高顺铂的疗效,改善卵巢癌患者的预后.

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