摘要：

Apoptosis is a significant physiological process involved not only in normal tissue homeostasis, but also in most pathological processes. Although much has been written about how apoptosis is executed, the details of how it is regulated remain elusive. In this work, we report a direct interaction between the pro-apoptotic protein Siva1 and the C-terminal tail of multiple G protein coupled receptors, including TP, IP, PAF, AT1R and CHRM3. We show that TP stimulation by its agonist U46619 induces a cytoplasmic translocation and accumulation of Siva1 and modulates its interaction with Mdm2, XIAP and TRAF2, resulting in apoptosis induction. We report that Siva1 expression also potentiates stimulation-induced TP ubiquitination that does not affect receptor degradation or internalization. We demonstrate that TP stimulation decreases total expression of NFκB’s main inhibitor, IκBα, and that this effect correlates with Siva1 expression. By showing the existence of a stimulation-induced protein complex involving both TP and TRAF2, we suggest that NFκB activation upon TP stimulation might result from ubiquitin-dependent signalling pathways similar to those seen with TNFR. Moreover, we report an interaction between Siva1 and arrestin and reveal data suggesting that Siva1 expression might modulate MAPK activation upon TP stimulation. We finally present a model unifying TP’s anti- and pro-apoptotic functions in which the final stimulation phenotype depends on the relative expression of Siva1. The implications of this model range from the treatment of ischemic events such as myocardial infarction and stroke to the improvement of cancer chemotherapy where both treatment toxicity and cancer cells resistance could be better understood. L’apoptose est un processus dont l’importance physiologique et pathophysiologique est de mieux en mieux appréciée. Si plusieurs mécanismes expliquant son initiation et son exécution ont été décrits, les détails de sa régulation fine restent à être précisés. Par ces travaux, nous démontrons une interaction directe entre la protéine pro-apoptotique Siva1 et la queue C-terminale de plusieurs récepteurs couplés aux protéines G, incluant TP, IP, PAF, AT1R et CHRM3. Pour TP, nous prouvons que la stimulation du récepteur par le U46619 entraîne une translocation et une accumulation cytoplasmique de Siva1, ainsi qu’une modulation de ses interactions avec Mdm2, XIAP et TRAF2, résultant en une induction de l’apoptose. Nous rapportons également que l’expression de Siva1 potentialise l’ubiquitinylation de TP en réponse à une stimulation et que cette ubiquitinylation n’affecte ni la dégradation, ni l’internalisation du récepteur. Nous démontrons par ailleurs que la stimulation de TP diminue l’expression totale d’IκBα, l’inhibiteur principal de la voie NFκB et que cet effet corrèle avec le niveau d’expression de Siva1. En démontrant l’existence d’un complexe entre TP et TRAF2 suite à une stimulation réceptorielle, nous proposons que la modulation NFκB par TP pourrait résulter d’une signalisation dépendant de l’ubiquitine et analogue à celle des TNFR. D’autre part, nous présentons une interaction entre Siva1 et l’arrestine et apportons des données suggérant que l’expression de Siva1 pourrait moduler l’activation des MAPK. Nous proposons finalement un modèle réconciliant les fonctions anti- et pro-apoptotiques de TP et dans lequel le phénotype final d’une stimulation dépendrait de l’expression relative de Siva1. Les corolaires de ce modèle pourraient possiblement bonifier la prise en charge d’incidents ischémiques comme l’infarctus du myocarde ou l’accident vasculaire

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