摘要：

自然界中的植物内生真菌种类繁多,总数超过100万种.内生真菌往往通过其小分子次生代谢产物参与宿主植物的生长,繁殖和化学防御等活动,从而具有巨大的潜在药用价值.据统计从内生真菌中发现新型化合物的比例远远超过土壤微生物(51%:38%),成为近年来天然药物研究的热点之一.尤其是生活在盐碱地,海洋,沼泽等植物的内生真菌因其宿主生存环境特殊,有可能具有特殊的代谢机制而备受关注.本研究共选取东营莱州湾沿海的17个植物样品进行微生物的分离和培养,得到植物内生真菌245株;运用抗肿瘤活性筛选手段得到活性菌株(粗浸膏浓度在100μg/ml时,抑制率大于40%)27株;结合化学筛选信息从中选取三株真菌(Penicillium sp. SXH-65,Penicillium chrysogenum SXH-63和Emericella nidulans SXH-69)为目标菌株进行深入的活性成分研究. 采用多种色谱学分离纯化方法,从三株目标菌株中共分离得到单体化合物35个:从Penicillium sp. SXH-65菌株浸膏中分离得到化合物21个,新化合物3个,新天然产物1个;从Penicillium chrysogenum SXH-63菌株浸膏中分离得到化合物4个,新化合物2个;从Emericella nidulans SXH-69菌中分离得到化合物10个.所得单体化合物的结构类型具有高度的多样性,包括混源萜类化合物,苯二氮卓类化合物,吡喃酮类化合物,三酮类化合物,苯的衍生物等.采用SRB和MTT的方法,评价了混源萜类化合物,苯二氮卓类化合物和吡喃酮类化合物的抗肿瘤活性,所选细胞模型主要包括Hela,HL-60,A549和K562细胞系.通过研究首次发现混源萜类化合物有细胞毒活性,其IC50在24至60μM.采用纸片法,首次评价了苯二氮卓类化合物的抗菌活性,所选菌株主要包括Proteusbacillus,Escherichia coli,Bacillus subtillis和Micrococcus tetragenus,通过研究发现该类化合物无明显的抗菌活性,为进一步探讨该类化合物的活性位点奠定了一定的基础. 综上,从滨海来源植物中共分离得到内生真菌245株,活性菌株27株,选取三株菌株作为目标菌株进行次级代谢产物研究,共分离得到单体化合物35个,阐明了全部化合物的结构,新化合物5个,新天然产物1个,并对部分系列化合物进行了抗肿瘤活性和抗菌活性的评价.本研究进一步丰富了海洋天然产物化学化合物库;发现了具有新的抗肿瘤细胞活性的化合物,为抗肿瘤天然产物的研究奠定了基础.

展开