Smac基因过表达对胃癌细胞株MKN-45化疗敏感性的影响
摘要：
背景与目的:细胞凋亡异常是肿瘤细胞产生耐药性的关键因素之一. Smac(second mitochondria-derived activator of caspases,Smac或称 DIABLO)是新近发现的一种凋亡调节基因,在介导化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡中起重要作用.本研究旨在观察 Smac基因过表达对胃癌细胞株化疗敏感性的影响.方法:采用脂质体 GeneSHUTTLE-40介导的方法,将 Smac基因转入胃癌细胞 MKN-45, RT-PCR和 Western blot法检测癌细胞中 Smac的表达;选用顺铂 (1, 5, 10 μ g/ml),丝裂霉素 (0.1, 1, 10 μ g/ml)和姜黄素 (10, 20, 40 μ mol/L)分别处理转染前后的胃癌细胞,四甲基偶氮唑蓝( MTT)比色法检测细胞增殖活性,倒置显微镜下观察细胞形态变化并摄影, Annexin V-FITC和碘化丙啶双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:同未转染对照组比较,转染外源性 Smac基因后 MKN-45细胞 Smac mRNA和蛋白表达水平显著增高( P< 0.01);各浓度顺铂,丝裂霉素和姜黄素处理 24 h后,细胞生长抑制率分别 增加 10.10%～ 23.80%( P< 0.01), 10.01%～ 15.86%( P< 0.01), 11.28%～ 22.12%( P< 0.01),细胞明显变圆,折光增强,漂浮细胞增多,细胞凋亡率分别增加 6.7%～ 20.2%( P< 0.01), 5.4%～ 13.2%( P< 0.01), 10.6%～ 20.1%( P< 0.01).结论:转染外源性 Smac基因并使其在胃癌细胞中过表达,能提高 MKN-45对化疗药物的敏感性.
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DOI：
10.3969/j.issn.1000-467X.2004.04.001
被引量：
年份：
2004
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