摘要：

目的研究NCA[硝酰基(HNO,一氧化氮的单电子还原产物,对活体心脏发挥正性肌力作用)供体,l—nitrosocyclohexylacetate]的作用效果及其巯基靶点机制。方法大鼠右心室的完整梳状肌被连接在张力换能器与刺激电极之间,肌小节长度设定在2.2~2.3μm之间,K—H液表面灌流后(pH7.4,室温),Fura-2经玻璃微电极负载进行离子透入法检测[Ca^2+],同时测定心肌收缩张力的变化。Western blotting方法检测NCA对Tm(肌原纤维蛋白)、MLC(肌凝蛋白轻链)和TnI(肌钙蛋白1)的影响。结果收缩力在NCA作用下呈剂量依赖性增加(20~100μmol·L^-1)。不同频率作用下(0.5~3.0Hz,NCA20μm01·L^-1,Ca^2+0.5μmol·L^-1)收缩力的增加(P〈0.01)和[Ca^2+].瞬变(P〉0.05)没有受到明显的影响。同对照组相比,NCA处理组去肌膜心肌收缩力明显增加(P〈0.05),且作用效果具有结构唯一性特点。非还原条件下Western blotting可见Tm出现交联。巯基还原剂二硫苏糖醇(DTT,5.0μmol·L^-1)能够阻止并逆转NCA的活动。结论NCA提供的硝酰基是心脏钙离子增敏剂,心肌调节蛋白质巯基翻译后修饰可能是其靶点作用所在。

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