摘要：

目的:研究微小RNA-16(miR-16)在人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞中的表达及其与顺铂耐药的关 系.方法:脂质体lipofectamine2000介导miR-16成熟体模拟物(mimics)及阴性对照片段(NC)分别转染人卵巢癌顺铂耐药细胞 株SKOV3/DDP.实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-16的表达;蛋白印迹法检测细胞中Bcl-2蛋白,c-myc蛋白的表达;四甲基偶氮唑 蓝(MTT)比色法检测细胞的顺铂半数抑制浓度(IC50);caspase-3活性检测试剂盒检测细胞内caspase-3酶的活性;流式细胞仪检测细 胞的凋亡率.结果:(1)SKOV3/DDP细胞顺铂耐药指数(RI)为5.33;(2)SKOV3/DDP细胞中miR-16表达水平明显低于 SKOV3细胞,约为后者的1/10(P=0.000),转染miR-16 mimics后SKOV3/DDP 细胞中miR-16水平升高约660倍(P=0.001);(3)SKOV3/DDP细胞Bcl-2,c-myc蛋白的相对表达量较SKOV3细胞明显升 高,转染miR-16 mimics后SKOV3/DDP细胞Bcl-2,cmyc蛋白的相对表达量明显降低(P<0.01);(4)SKOV3/DDP细胞转染miR-16 mimics 后,顺铂IC50(14.19±0.06)较转染NC组(22.52±0.60)明显降低(P=0.002),且顺铂作用后caspase-3的酶活力单 位也明显升高(P=0.000);(5)顺铂(20μg/ml)作用24h,48h 后,SKOV3组凋亡率明显高于SKOV3/DDP纽,转染miR-16 mimics的SKOV3/DDP细胞凋亡率约为转染NC细胞的1.5倍(P<0.01).结论:miR-16可能通过靶向下调上皮性卵巢癌细胞Bcl- 2蛋白,并协同调节c-myc蛋白的表达,增强卵巢癌顺铂耐药细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性,发挥逆转耐药的作用.

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