摘要：

目的:总结林丽珠教授运用益肺散结丸治疗肺癌肺脾气虚证型的典型病例,并应用液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(LC-Q-TOF-MS)对益气散结丸进行进行成分分析,抗肿瘤有效成分的筛选.方法:1.通过对林丽珠教授中西医结合治疗肺癌疗效达到部分缓解(PR)及以上的病例和中药维持治疗中晚期肺癌的病例进行整理分析,归纳临证心得,总结林丽珠教授运用益肺散结丸治疗肺癌的经验.2.益气散结丸进行预处理,通过细胞毒性实验,筛选抗肿瘤效果最佳的活性部位,并对活性部位进行成分分析,结合多维统计分析,筛选出可能为抗肿瘤效果最好的成分10种,并对10种成分进行分子对接.结果:林丽珠教授认为肺癌的病机主要是正气虚损为本,痰瘀互结为标."虚,毒,瘀,结"为肺癌形成的病理原因,故其治疗当以益肺,散结,化痰主要治法.对于肺癌早,中,晚期的维持治疗,以及口服靶向治疗患者均可以益肺散结丸为主方,结合患者体质,可配伍化痰散结,清热解毒,化痰止咳,补气生津,温补脾肾,消食化积,行气导滞等中药治疗.根据小样本的患者资料数据分析,患者可长期服用益肺散结丸进行维持治疗.通过对益肺散结丸的活性部位进行预处理,将其分为总提物,30%,50%,70%,100%甲醇固相萃取四个活性部位,对5个样本进行细胞毒性实验,其中100%甲醇固相萃取的部位抗肿瘤活性最优,IC50=88.75μ g±0.74μg.对四种活性部位及总提物的峰面积和保留时间进行主成分分析,结合100%甲醇固相萃取的部位的液相色谱图和质谱分析,筛选出排名前10位的可能的抗肿瘤活性成分分别为:4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸,3-[(4-0-D-葡萄糖基)-苯基]-2-丙烯酸,灵芝烯酸D,肉豆蔻酸,迷迭香酸,没食子酸,贝母尼丁,灵芝酸C2,亚麻酸,异鼠李素.根我们之前的研究,认为GRP78蛋白为调控内质网应激诱导肿瘤细胞凋亡的一个关键蛋白,因此将GRP78蛋白用于分子对接,结果显示异鼠李素,3-[(4-O-D-葡萄糖基)-苯基]-2-丙烯酸,灵芝烯酸D,贝母尼丁,迷迭香酸为可能的抗肿瘤成分.结论:益肺散结丸为林丽珠教授根据多年经验总结的治疗肺癌的经验用方,在临床上有广泛的应用,对于各个阶段的肺癌患者均有明显改善症状,提高生存质量的作用,一定程度上可以延长无进展生存期,以及延长晚期病人姑息治疗的生存期.通过对益肺散结丸活性部位的提取和筛选,认为100%甲醇固相萃取部位抗肿瘤效果最佳.并通过生物活性部位筛选结合液质联用技术对化合物进行鉴定,以及分子对接模拟预测,结合氢键,氨基酸残基以及文献学习,初步鉴定异鼠李素,贝母尼丁,迷迭香酸为有效的抗肿瘤物质.

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